Max-Planck-Institut für chemische Ökologie, Deutschland

F: Was ist der Forschungsschwerpunkt Ihres Labors?

A: Eines der Themen unseres Labors ist die Interaktion von Insektenpheromonen und ihren Analoga mit Pheromon-bindenden Proteinen (PBPs), die Teil eines äußerst empfindlichen Mehrkomponenten-Pheromon-Detektionssystems sind.

Wir verwenden Bindungsassays, um die Funktion der PBPs durch Affinitätsmessungen der Protein-Ligand-Rezeptoren zu bestimmen, Bindungskonstanten und die räumliche Anordnung des Komplexes zu berechnen und Modellierungen durchzuführen. Darüber hinaus werden punktmutierte PBPs verwendet, um den Beitrag einzelner Aminosäuren zum Bindungsereignis besser zu verstehen.

F: Wie passt der TriVersa NanoMate® (TVNM) zu Ihren Forschungszielen?

A: Das TVNM ermöglichte uns die Entwicklung einer Hochdurchsatzmethode zur Untersuchung von Protein-Ligand-Wechselwirkungen für große Serien verschiedener Pheromone und ihrer Analoga.

Da die beteiligten Bindungsenergien sehr niedrig sind und wir die native Struktur der Moleküle bewahren müssen, sind die Bedingungen der weichen Ionisierung des TVNM perfekt für uns. Darüber hinaus sind diese Untersuchungen mit klassischem Elektrospray aufgrund der Klebrigkeit der Proben schwierig. Sie verursachen Probleme durch kurze Reinigungszyklen und führen zu Verunreinigungen.

Im Gegensatz dazu ist die etablierte Methode mit dem TVNM zuverlässig und stabil und beseitigt Probleme mit klebrigen Proben. Darüber hinaus sind Mehrfachexperimente mit sehr geringen Proteinmengen (1 nmol) bei unterschiedlichen Kegelspannungsbedingungen möglich.

Wir haben kürzlich die LESA™-Funktion (Liquid Extraction Surface Analysis) zum TVNM hinzugefügt. Dies ermöglicht es uns, mutmaßliche Signalmoleküle auf Blattoberflächen zu erkennen und ihre Produktions- und Speicherorte aufzuspüren, indem wir die Daten mit Extrakten aus Proben vergleichen, die aus den inneren Kompartimenten der Blätter stammen.

F: Wem würden Sie den TriVersa NanoMate für seine Forschung empfehlen?

A: Ich würde den TriVersa NanoMate jedem empfehlen, da er eine universelle Quelle ist. Mit direkter Infusion, Kopplung zur Fraktionssammlung und Oberflächenanalyse kann es alle Ionisierungsquellen ersetzen.