Purificación flash de carbohidratos con puriFlash® 5.030 y ELSD integrado

Instrumentación
Sistema de cromatografía flash: puriFlash^® 5.030 con paquete iELSD
Columna: puriFlash^® 50 µm NH2 F0025

Autor
Equipo de aplicaciones
Advion Interchim Científico

Introducción
Los carbohidratos son compuestos no cromóforos que suelen generar señales planas cuando se utiliza únicamente la detección UV. En esta nota de aplicación, mostramos la purificación de carbohidratos con ELSD y cómo esta detección puede contribuir a la purificación.

¿Por qué utilizar ELSD de Advion Interchim Scientific?

• • Detectar compuestos cromóforos y no cromóforos como carbohidratos.
  • Bajo mantenimiento con disolvente de reposición de isopropanol para ELSD
  • IPA empuja la muestra al ELSD
  • Limpieza del sistema mientras se procesa para la purificación => casi sin mantenimiento. Recarga automática.
  • Elimina el riesgo de saturación de la señal o no detección.
  • Permite detectar y recolectar compuestos de baja concentración.
  • Fácil configuración (sin parámetros que predecir, fácil de usar)
  • Ganancia automática para ver claramente todos los compuestos al mismo tiempo (Figura 1)
  • Bajo consumo de muestra 40 µL/min
  • ELSD es un modo de detección destructivo, gracias a que la cantidad del divisor automático enviada al detector se controla
  • Bajo consumo de gas (1 – 1.5 L/min a 1-1.5 bar)
  • Tecnología de baja temperatura

  
  Figura 1: La ganancia automática permite a los usuarios ver claramente todos los compuestos al mismo tiempo

  Método
  Configuración experimental
  Sistema de cromatografía flash: puriFlash^® 5.030 con paquete iELSD
  Columna puriFlash^®: 50 µm NH2 F0025
  Muestra: D(-)Fructosa 100 mg
  Alfa (D)-lactosa 100 mg
  Detector: ELSD 35°C
  Ultravioleta: 254 nm

  

  Resultados y Discusión
  Señal ELSD
  
  Figura 2: ELSD muestra una buena intensidad de señal y suavizado.

  Señal UV 254 nm
  

  Señal UV SCAN 200-800 nm
  

  Figura 3 y 4: Los compuestos no son visibles con UV. El escaneo comienza a mostrar baja intensidad para los primeros compuestos, pero no lo suficiente como para obtener una buena recolección.

  Conclusión
  Los carbohidratos son compuestos no cromóforos y no se pueden detectar mediante UV, es necesario utilizar un detector ELSD que proporcione una buena detección.

  El detector ELSD que propone AIS es capaz de proporcionar varios beneficios para el usuario:

• No es necesario definir la ganancia en función de la carga.
• Gracias a la tecnología de baja temperatura, es posible observar más compuestos (especialmente sensibles a la temperatura o volátiles)
• En esta aplicación usamos agua y 35 °C fueron suficientes para eliminar la respuesta del agua y obtener una señal plana.