Muérdago: ¿Beso de amor o muerte? Uso de cromatografía de capa fina con espectrometría de masas compacta

Dedicado a la ciencia, dedicado a ti

Muérdago

Especificación de masa: exprensaion® CMS
Muestreo: Plate Express ™ 

 En el espíritu de la temporada navideña y para garantizar que los besos de muérdago se disfruten y sean 'no tóxicos', empleamos el Advion Interchim Scientific exprensaion® El espectrómetro de masas compacto (CMS) y el lector de placas Plate Express ™ TLC para analizar una tintura comercial de extracto etanólico de muérdago para determinar si la tiramina está presente en el extracto de muérdago. 

INTRODUCCIÓN 

Una ramita de muérdago simboliza una tradición de romance (Figura 1) y tiene un legado de folclore que afirma que los extractos de muérdago pueden curar el cáncer junto con una larga lista de otros beneficios para la salud reportados. Sin embargo, el muérdago también se considera letal. Algunos dicen que el muérdago, que tiene fama de ser el "beso de la muerte", es tan venenoso que los humanos pueden morir si ingieren las hojas o las bayas. 

Figura 1: La tradición del muérdago.
Muérdago

La toxicidad reportada nos hizo preguntarnos, ¿por qué o cómo pueden los vendedores vender extractos de muérdago para consumo humano intencional? Una especie de muérdago, Viscum, contiene el alcaloide venenoso tiramina, que puede causar visión borrosa, náuseas, dolor abdominal, diarrea, cambios en la presión arterial e incluso la muerte. Una búsqueda de literatura científica revisada por pares revela una escasez de apoyo analítico creíble para la presencia de tiramina en el muérdago. 

En el espíritu de la temporada navideña y para garantizar que los besos de muérdago se disfruten y sean 'no tóxicos', empleamos el sistema Advion Interchim Scientific TLC / CMS (Figura 2) para analizar una tintura comercial de extracto etanólico de muérdago para determinar si la tiramina está presente en el extracto de muérdago.

Figura 2: Configuración experimental de Advion Interchim Scientific exprensaion® CMS con el lector de placas Plate Express™ TLC.
CMS y Plate Express
Figura 3: Hierbas experimentales utilizadas.
Hierba de muérdago

EXPERIMENTAL 

Se compró una tintura de muérdago de Indigo Herbs. Una pequeña alícuota de esta muestra de tintura se derivatizó con cloruro de dansilo a 50 ºC durante 30 min de acuerdo con procedimientos bien conocidos.[ 1 ]. De manera similar, una muestra auténtica de tiramina se derivatizó de la misma manera para formar su derivado dansilo. 

Se aplicó una pequeña alícuota (10 ml) del derivado estándar de tiramina dansilo a los carriles exteriores (carriles 1 y 4) de una placa Merck Silica gel G TLC. Se aplicó una alícuota de la tintura derivatizada de muérdago al carril 2 y se aplicó una tintura derivatizada de muérdago enriquecida con derivado de tiramina dansilo al carril 3 (Figura 4). 

Figura 4: Placa de TLC después del revelado y visualización bajo luz ultravioleta de longitud de onda larga. Carriles 1 y 4: Derivado de dansilo de tiramina estándar. Carril 2: Mezcla de reacción de derivado de dansilo de muestra de tintura de muérdago. Carril 3: Extracto de tintura de derivado de dansilo con un derivado de dansilo de tiramina estándar añadido. (A) Rf = 0.3 para el derivado de tiramina dansilo. (B) Rf = 0.6 para cloruro de dansilo.
Resultados de muérdago

La placa de TLC secada al aire se reveló en un tanque de disolvente equilibrado que contenía cloroformo/acetato de etilo (8/2, v/v). A continuación, la placa de TLC revelada se observó bajo luz ultravioleta de longitud de onda larga para revelar los componentes separados (Figura 3). La placa de TLC se colocó en el lector de placas de TLC Plate Express™, después de lo cual cada "mancha" de TLC pudo analizarse individualmente mediante TLC/CMS. 

Con referencia a la Figura 4, el análisis de TLC / CMS mostró fácilmente que los puntos de Rf 0.3 en los dos carriles exteriores (carriles 1 y 4) producían un espectro de masas con un abundante m / z 371 consistente con la molécula protonada esperada del derivado de tiramina dansilo (Figura 5A). Los espectros de masas de TLC / CMS obtenidos de los puntos con un Rf = 0.6 observados en los carriles 1 y 4 fueron consistentes con cloruro de dansilo sin reaccionar con una molécula protonada en m / z 270 (datos no mostrados). El análisis de TLC / CMS de la mancha en el carril 2 a Rf = 0.3 no mostró evidencia de la presencia de derivado de tiramina dansilo (Figura 5B). 

Figura 5: (A) Espectro de masas de TLC / CMS del derivado de dansilo de tiramina estándar observado a Rf = 0.3 en la Figura 4 Carril 1. (B) Espectro de masas LC / CMS de tintura derivatizada de muérdago observado a Rf = 0.3 en la Figura 4 Carril 2. 

Espectros de muérdago

En ausencia de análisis de TLC / CMS, sería lógico concluir que la mancha en Rf = 0.3 en el carril 2 se debió a la presencia de tiramina en la muestra de tintura de muérdago. La mancha Rf = 0.3 observada para el extracto de tintura reforzada en el carril 3 de la Figura 4 mostró fácilmente el mismo espectro de masas para el derivado de tiramina dansilo que se muestra en la Figura 5A. Los mismos resultados negativos para la tiramina se obtuvieron del extracto alcohólico del producto de hoja de muérdago. 

CONCLUSIONES 

Los resultados de este breve estudio sugieren que el nivel de tiramina en la muestra de tintura es muy bajo y está por debajo de nuestros límites de detección o que la tiramina no está presente en la muestra. Es común que los químicos forenses y sintéticos empleen técnicas de TLC como una pantalla rápida y fácil de una muestra para determinar la presencia de una sustancia química esperada. La comparación con una muestra conocida, que muestra el mismo valor de Rf, proporcionará a menudo cierta confianza para informar la presencia del compuesto esperado. Sin embargo, como sugiere este ejemplo, un valor de Rf similar no garantiza la confirmación de la identidad del lugar cuando tiene el mismo valor de Rf. Como se muestra aquí, acceda al análisis directo del spot con el Advion Interchim Scientific exprensaion® CMS puede corroborar la identificación esperada o, como en este caso, sugerir que la mancha con el mismo valor de Rf NO es el compuesto esperado. Estos resultados pueden explicar por qué las muestras comerciales de tintura de muérdago no son dañinas para fines medicinales. ¿Entonces, qué debería hacer? El muérdago no es mortal. Pero puede ser peligroso, así que no lo coma. ¡Solo 'roba un beso debajo de él'! 

REFERENCIAS Y AGRADECIMIENTOS 

[ 1 ]Mullins, Donald E. y Eaton, John L. Cromatografía cuantitativa en capa fina de alto rendimiento de derivados dansilo de aminas biogénicas, Anal. Biochem., 1988, 172, (484 - 487). 

Gracias al Jefe Elf, Nigel Sousou, Ph.D., por liderar el proceso de análisis de muestras.