Cuantificación precisa de especies de lípidos afectadas por superposición isobárica en espectrometría de masas por transformada de Fourier
Autores: Hospital Universitario de Ratisbona, Laboratorio Europeo de Biología Molecular, Alemania; Universidad del Sur de Dinamarca, Dinamarca
Resumen
Los datos lipidómicos requieren la consideración de iones con masas casi idénticas, que comprenden, entre otros, el solapamiento isotópico de Tipo II. Esta superposición ocurre en una serie de especies de lípidos que difieren solo en el número de dobles enlaces (DB) principalmente debido a la abundancia natural de 13Átomos de C La espectrometría de masas de alta resolución, como la espectrometría de masas por transformada de Fourier (FTMS), es capaz de resolver la superposición de tipo II según el poder de resolución de masas. En este trabajo, evaluamos la precisión de la cuantificación de FTMS de las especies de lípidos afectadas por la superposición de Tipo II. Los experimentos de picos con pares de especies de lípidos de varias clases de lípidos se analizaron mediante análisis de inyección de flujo-FTMS. La precisión de la cuantificación se evaluó sin y con la corrección de Tipo II (utilizando la abundancia relativa de isótopos), así como utilizando el primer pico isotópico (M + 1). Los picos isobáricos, que se resolvieron suficientemente, fueron más precisos sin la corrección de Tipo II. En los casos de picos parcialmente resueltos, observamos una interferencia de pico que causa distorsiones en masa e intensidad, que es un fenómeno bien descrito en FTMS. Las concentraciones de las respectivas especies fueron más precisas cuando se calcularon a partir de M + 1. Además, algunas especies menores, afectadas por una considerable superposición de Tipo II, solo pudieron cuantificarse mediante M + 1. Inesperadamente, incluso los picos completamente no resueltos fueron sobrecorregidos sustancialmente por la corrección de Tipo II debido a la interferencia de los picos. El método descrito fue validado incluyendo precisiones intradiarias e interdiarias para muestras de suero humano y fibroblastos. Tomados en conjunto, nuestros resultados muestran que la cuantificación precisa de especies de lípidos por FTMS requiere un análisis de datos dependiente de la resolución.
Las muestras se infundieron utilizando el Advion Interchim Scientific® TriVersa NanoMate®.