Caracterización de canales de sodio endógenos en la línea celular de neuroblastoma ND7-23: implicaciones para su uso como un sistema de expresión de canales de iones heterólogos adecuado para el cribado automatizado de pinza de parche
Xention Limited, Reino Unido; Universidad de Ljubljana, Eslovenia
Resumen
La línea celular de neuroblastoma de roedor, ND7-23, se usa para expresar sodio dependiente de voltaje (Nav) y otros canales iónicos neuronales resistentes a la expresión heteróloga en células de ovario de hámster chino (CHO) o riñón embrionario humano (HEK). Su ventaja es que proporcionan factores endógenos y vías de señalización para promover el plegamiento, la expresión y la función del péptido del canal iónico en la superficie celular y también son susceptibles de pinzamiento automático con parche. Sin embargo, las células ND7-23 exhiben corrientes Nav sensibles a la tetrodotoxina (TTX) endógena, y el perfil molecular ha revelado la presencia de transcripciones Nav1.2, Nav1.3, Nav1.6 y Nav1.7, pero ningún estudio ha determinado qué subtipos Contribuyen a los canales funcionales en la superficie celular. En esta publicación, perfilamos el repertorio de canales Nav funcionales expresados endógenamente en células ND7-23 utilizando la plataforma de pinza de parche automatizada QPatch y toxinas selectivas y moléculas pequeñas.
El análisis de espectrometría de masas se realizó utilizando el Advion exprensaion Espectrómetro de masas compacto (CMS).