Desarrollo y aplicación de perfiles de lípidos unicelulares de alto rendimiento: un estudio de SNCA-A53T Neuronas de dopamina humana
Universidad de Cambridge, Universidad Royal Holloway de Londres
Destacados
- Combinando FACS y LESA-MS para establecer un perfil de lípidos unicelulares de alto rendimiento
- Diferencias de lípidos encontradas dentro y entre poblaciones de neuronas de dopamina humanas
- La heterogeneidad de lípidos intercelulares aumenta en SNCA-A53T neuronas de dopamina
- Identificación y aislamiento de neuronas de dopamina iPSC humanas con un reportero TH-RFP
Resumen
Los avances en la genómica y transcriptómica unicelular han demostrado que a nivel de tejido existe una heterogeneidad celular compleja. Para comprender el efecto de esta heterogeneidad intercelular sobre el metabolismo, es esencial desarrollar un enfoque de perfil de lípidos de una sola célula que permita la medición de lípidos en un gran número de células individuales de una población. Esto proporcionará una lectura funcional de la actividad celular y la estructura de la membrana. Utilizando el análisis de la superficie de extracción de líquidos junto con la espectrometría de masas de alta resolución, hemos desarrollado un método de alto rendimiento para el perfil de lípidos de una sola célula no dirigida. Este avance tecnológico destacó la importancia de la heterogeneidad celular en el metabolismo funcional de las neuronas de dopamina humana individuales, lo que sugiere que la alfa-sinucleína A53T (SNCA) las neuronas mutantes tienen una función de membrana alterada. Estos resultados demuestran que esta plataforma de perfil de lípidos unicelulares puede proporcionar datos sólidos que ampliarán las fronteras de la investigación biomédica.