Publicación

Modificación oxidativa de los lípidos de la piel por plasma atmosférico frío (CAP): un enfoque estandarizable usando RP-LC / MS2 y DI-ESI / MS2 - Uso de TriVersa NanoMate

 
La tecnología de ionización por nanoelectrospray Advion TriVersa NanoMate fue seleccionada como la fuente de iones por sus capacidades de rociado prolongadas y estables, ideales para el análisis de lípidos.

 

Resumen

El plasma atmosférico frío (CAP) es una fuente emergente para la liberación localmente definida de especies reactivas, y su potencial clínico se ha identificado en el control de procesos inflamatorios, como heridas agudas y crónicas o lesiones cancerosas. Los lípidos, debido a su localización y estructura química como dianas ideales para las especies oxidativas, son modificadores relevantes de los procesos fisiológicos. Los lípidos de la frente humana recogidos en un objetivo se trataron con un chorro de plasma de argón y se analizaron inmediatamente mediante espectrometría de masas en tándem de alta resolución de infusión directa (DI-MS2) o cromatografía líquida en tándem MS (RP-LC / MS2). El análisis de datos posterior fue realizado por LipidHunter (Universidad de Leipzig), LipidXplorer (Instituto Max Planck de Biología Celular Molecular y Genética, Dresden) y LipidSearch (TS). Con cualquiera de los métodos de EM, se detectaron todas las principales clases de lípidos de lípidos del sebo. Diferencias significativas con respecto a los triacilgliceroles (identificados predominantemente en RP-LC / MS2) y ceramidas (identificadas predominantemente en DI-MS2) indican distinciones experimentales o inherentes al enfoque. Se detectó una oxidación impulsada por CAP de triaciclgliceroles, ceramidas y ésteres de colesterilo, como truncamientos e hidroperoxilaciones, pero en un grado significativamente menor de lo esperado. La eliminación de especies reactivas debido a los antioxidantes presentes de forma natural en las muestras y la ausencia de una interfase líquida que permita la deposición de especies reactivas por el CAP habrá contribuido a la cantidad limitada de productos de oxidación observados. Además, las limitaciones de la capacidad del software para identificar lípidos oxidados inesperados condujeron potencialmente a una subestimación del impacto de la PAC en los lípidos de la piel, lo que indica la necesidad de un mayor desarrollo del software. Con respecto a la aplicación clínica de CAP, el resultado indica que la piel intacta con su capa de sebo / lípido epidérmico está bien protegida y que un tratamiento moderado producirá consecuencias funcionales limitadas (si las hay) en el tejido dérmico.