Lipidómica de escopeta en un espectrómetro de masas LTQ Orbitrap mediante el cambio sucesivo entre modos de polaridad de adquisición
Autores: Instituto Max Planck de Biología Celular Molecular y Genética, Universidad Tecnológica de Dresden, Alemania; Advion Biosciences Ltd., Reino Unido
Resumen
La lipidómica de arriba hacia abajo se basa en la infusión directa de extractos de lípidos totales en un espectrómetro de masas en tándem de alta resolución e implica que los lípidos individuales se reconocen por su determinación precisa m/z. La eficiencia de la ionización de lípidos y la especificidad de detección dependen en gran medida de la polaridad de adquisición y, por lo tanto, es beneficioso analizar mezclas de lípidos tanto en modo positivo como negativo. Los espectrómetros de masas híbridos LTQ Orbitrap se aplican ampliamente en la lipidómica de arriba hacia abajo; sin embargo, anteriormente el cambio rápido de polaridad no era factible debido a la degradación severa e inmediata de la precisión de la masa. Aquí, informamos sobre un método para adquirir rápidamente espectros de alta resolución en ambos modos de polaridad con una precisión de masa inferior a ppm y demostramos que no solo simplifica y acelera los análisis de lipidómica de escopeta, sino que también mejora la cobertura de lípidos porque hay más clases de lípidos y más especies individuales. dentro de cada clase son reconocidos. De esta manera, el análisis de escopeta de extractos de lípidos totales de plasma sanguíneo humano permitió cuantificar 222 especies de 15 clases de lípidos principales dentro de un ciclo de adquisición de 7 minutos.
El análisis Nano-ESI y el cambio de polaridad en línea se realizaron utilizando Advion TriVersa NanoMate.