Estrategia para la anotación y cuantificación metabolómica no dirigida mediante un sistema de espectrometría de masas de infusión directa con nanoelectrospray de unión espectral de alta resolución con adquisición independiente de datos
Resumen
La espectrometría de masas de alta resolución con ionización por nanoelectrospray por infusión directa (DI-nESI-HRMS) es una alternativa a las técnicas basadas en cromatografía-MS para la metabolómica no dirigida, ofreciendo un alto rendimiento de muestra. Sin embargo, la precisión en la anotación de analitos aún presenta desafíos. En este estudio, propusimos una estrategia para la anotación y cuantificación de datos metabolómicos no dirigidos mediante un método DI-nESI-HRMS de unión espectral con adquisición independiente de los datos. La estrategia de anotación de metabolitos incluyó la distribución isotópica, la similitud espectral MS/MS y la correlación de iones precursores y productos, así como la comparación de las características de los metabolitos extraídos con los precursores de los metabolitos diana. Se utilizaron dos grupos de soluciones estándar mixtas con 40 y 79 metabolitos, respectivamente, para establecer la estrategia de anotación de metabolitos y validar su fiabilidad. Los resultados mostraron que los estándares detectados se podían anotar correctamente en las tres explicaciones principales, y los porcentajes cualitativos totales fueron del 100 % (40 de 40) para la solución estándar y del 94.9 % (74 de 78) para los estándares añadidos a la matriz sérica. La intensidad de los iones precursores se utilizó para la cuantificación, excepto para los isómeros, que se cuantificaron mediante las intensidades de los iones producto característicos, si estaban disponibles. Finalmente, la estrategia se aplicó para estudiar la metabolómica sérica en la diabetes, y los resultados demostraron que es prometedora para un estudio metabolómico de cohortes a gran escala.
Advion Interchim Científico® Triversa NanoMate® (Advion, Ithaca, NY).