Purification à haut débit de cinq composés de médicaments en vente libre et sur ordonnance par LC-MS préparative en phase inverse
Instrumentation:
puriFlash® 5.250
exPression® CMS
Uptisphère® Colonne StrategyTM US5C18HQ-150/300
Auteurs:
Advion Interchim Scientific, Montluçon, France Siège social
Introduction
La purification est une étape critique dans le développement de médicaments. De la recherche à la mise à l'échelle en passant par le processus, la purification et la confirmation sont des étapes essentielles pour mettre un médicament sur le marché. Il est essentiel de disposer d'une solution à haut débit offrant une quantité suffisante et une qualité reproductible de composés purifiés. La séparation des ingrédients pharmaceutiques actifs (API) de leurs impuretés peut être facilement réalisée avec un système de chromatographie préparative.
Cette note d'application présente la purification de cinq ingrédients actifs trouvés dans les médicaments en vente libre (OTC), y compris la caféine, la glafénine, le kétoprofène, la flavone et le fénofibrate (Figure 1), par un flux de travail de purification préparatoire avec confirmation à l'aide d'un spectromètre de masse compact.
Figure 1: Les cinq composés d'intérêt comprennent la caféine, la glafénine, le kétoprofène, la flavone et le fénofibrate. Les structures chimiques et les cas d'utilisation pharmaceutique sont mis en évidence ci-dessous.
Caféine: Produit chimique naturel aux effets stimulants, la caféine peut être trouvée purifiée sous forme de comprimés ou naturellement présente dans le café, le thé, le cacao et plus encore.
Glafénine : Anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), la glafénine a été retirée du marché en 1991 en raison d'un risque élevé d'anaphylaxie.
Kétoprofène : Anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS) délivré sur ordonnance, le kétoprofène est utilisé pour traiter inflammation, gonflement, raideur et douleurs articulaires. Le médicament a été arrêté en 1995 en raison d'un risque accru de crise cardiaque, d'accident vasculaire cérébral, d'irritation et d'autres problèmes.
Flavone : Un métabolite et nématicide qui existe couramment dans les plantes.
Fénofibrate : Médicament sur ordonnance utilisé pour réduire et traiter les taux élevés de cholestérol et de triglycérides (substances semblables aux graisses) dans le sang.
Expérience
Séparation LC exploratoire
Figure 2: Pour confirmer la présence des composés pré-identifiés, une analyse exploratoire LC-UV a confirmé la présence des composés médicamenteux avant la purification.
LC préparatoire
Suite à l'identification positive des cinq composés d'intérêt et de leurs points d'élution, le mélange de médicaments était alors prêt pour une analyse LC-UV préparative sur le puriFlash® 5.250 iELSD. La purification est facilitée par le pack iELSD, permettant la détection de composés sans chromophore (Figure 3).
Résultats et validation
Résultats de séparation et de purification
L'identité des composés séparés a été confirmée à l'aide de l'Advion Interchim Scientific exPression® Spectromètre de masse compact, identifiant rapidement et avec précision les composés d'intérêt.
La pureté de ces composés peut être vérifiée en utilisant une HPLC à échelle analytique.
