Gui : baiser d'amour ou de mort ? Utilisation de la chromatographie sur couche mince avec la spectrométrie de masse compacte
Spéc. de masse : exPression® CMS
Échantillonnage : Plate Express™
Dans l'esprit de la saison des fêtes et pour s'assurer que les baisers de gui sont appréciés et sont "non toxiques", nous avons employé l'ex Advion Interchim ScientificPression® Le spectromètre de masse compact (CMS) et le lecteur de plaques TLC Plate Express™ pour analyser une teinture commerciale d'extrait éthanolique de gui afin de déterminer si de la tyramine est présente dans l'extrait de gui.
INTRODUCTION
Un brin de gui symbolise une tradition de romance (Figure 1) et a un héritage folklorique prétendant que les extraits de gui peuvent guérir le cancer ainsi qu'une longue liste d'autres bienfaits pour la santé signalés. Cependant, le gui est également considéré comme mortel. Réputé pour être le "baiser de la mort", le gui est dit par certains comme étant si toxique que les humains peuvent être tués s'ils ingèrent les feuilles ou les baies.
Figure 1: La tradition du gui.
La toxicité signalée nous a amenés à nous demander pourquoi ou comment les vendeurs peuvent vendre des extraits de gui à des fins de consommation humaine ciblée ? Une espèce de gui, Viscum, contiendrait un alcaloïde toxique, la tyramine, qui peut provoquer une vision floue, des nausées, des douleurs abdominales, de la diarrhée, des changements de tension artérielle et même la mort. Une recherche dans la littérature scientifique évaluée par des pairs révèle un manque de soutien analytique crédible pour la présence de tyramine dans le gui.
Dans l'esprit de la période des Fêtes et pour garantir que les baisers de gui soient appréciés et qu'ils soient « non toxiques », nous avons utilisé le système Advion Interchim Scientific TLC/CMS (Figure 2) pour analyser une teinture commerciale d'extrait éthanolique de gui afin de déterminer si la tyramine est présent dans l'extrait de gui.
Figure 2: Installation expérimentale de l'ex Advion Interchim ScientificPression® CMS avec le lecteur de plaques Plate Express™ TLC.
Figure 3: Herbes expérimentales utilisées.
EXPERIMENTAL
Une teinture de gui a été achetée chez Indigo Herbs. Une petite aliquote de cet échantillon de teinture a été dérivée avec du chlorure de dansyle à 50 ºC pendant 30 min selon des procédures bien connues . De même, un échantillon authentique de tyramine a été dérivé de la même manière pour former son dérivé dansyle.
Une petite aliquote (10 ml) du dérivé de tyramine dansyle standard a été appliquée sur les voies extérieures (voies 1 et 4) d'une plaque de CCM au gel de silice G Merck. Une aliquote de la teinture dérivée de gui a été appliquée à la piste 2 et une teinture dérivée de gui enrichie de dérivé de tyramine dansyle a été appliquée à la piste 3 (figure 4).
Figure 4: Plaque TLC après développement et visualisation sous lumière UV de grande longueur d'onde. Pistes 1 et 4 : Dérivé dansyle de la tyramine standard. Piste 2 : mélange réactionnel de dérivé dansyle d'un échantillon de teinture de gui. Piste 3 : Teinture d'extrait de dérivé dansyle avec un dérivé de tyramine dansyle standard ajouté dedans. (A) Rf = 0.3 pour le dérivé de tyramine dansyle. (B) Rf = 0.6 pour le chlorure de dansyle.
La plaque de CCM séchée à l'air a été développée dans un réservoir de solvant équilibré contenant du chloroforme/acétate d'éthyle (8/2, v/v). La plaque TLC développée a ensuite été visualisée sous une lumière UV à longue longueur d'onde pour révéler les composants séparés (Figure 3). La plaque TLC a été positionnée sur le lecteur de plaques TLC Plate Express™, après quoi chaque « spot » TLC a pu être analysé individuellement par TLC/CMS.
En référence à la figure 4, l'analyse TLC/CMS a facilement montré que les spots Rf 0.3 dans les deux voies extérieures (voies 1 et 4) produisaient un spectre de masse avec un abondant m / z 371 en accord avec la molécule protonée attendue du dérivé de tyramine dansyle (figure 5A). Les spectres de masse TLC/CMS obtenus à partir des spots avec un Rf = 0.6 observés dans les pistes 1 et 4 étaient cohérents avec le chlorure de dansyle n'ayant pas réagi avec une molécule protonée à m / z 270 (données non présentées). L'analyse TLC/CMS de la tache dans la piste 2 à Rf = 0.3 n'a montré aucune preuve de la présence de dérivé de tyramine dansyle (figure 5B).
Figure 5: (A) Spectre de masse TLC/CMS du dérivé de tyramine dansyle standard observé à Rf = 0.3 sur la figure 4 piste 1. (B) Spectre de masse LC/CMS de la teinture dérivée de gui observé à Rf = 0.3 sur la figure 4 piste 2.
En l'absence d'analyse TLC/CMS, il serait logique de conclure que la tache à Rf = 0.3 dans la piste 2 était due à la présence de tyramine dans l'échantillon de teinture de gui. Le spot Rf = 0.3 observé pour l'extrait de teinture fortifié dans la piste 3 de la figure 4 montrait facilement le même spectre de masse pour le dérivé de tyramine dansyle que celui montré sur la figure 5A. Les mêmes résultats négatifs pour la tyramine ont été obtenus à partir de l'extrait alcoolique du produit de feuille de gui.
CONCLUSIONS
Les résultats de cette brève étude suggèrent soit que le niveau de tyramine dans l'échantillon de teinture est très faible et inférieur à nos limites de détection, soit que la tyramine n'est pas présente dans l'échantillon. Il est courant que les chimistes synthétiques et médico-légaux utilisent des techniques de CCM comme un criblage rapide et facile d'un échantillon pour déterminer la présence d'un produit chimique attendu. La comparaison avec un échantillon connu, qui montre la même valeur Rf, fournira souvent une certaine confiance pour signaler la présence du composé attendu. Cependant, comme cet exemple le suggère, une valeur Rf similaire ne garantit pas la confirmation de l'identité du spot lorsqu'elle a la même valeur Rf. Comme montré ici, l'accès à l'analyse directe de la tache avec l'ex Advion Interchim ScientificPression® CMS peut soit corroborer l'identification attendue, soit, comme dans ce cas, suggérer que la tache avec la même valeur Rf n'est PAS le composé attendu. Ces résultats peuvent expliquer pourquoi les échantillons commerciaux de teinture de gui ne sont pas nocifs à des fins médicinales. Alors, que devrais-tu faire? Le gui n'est pas mortel. Mais cela peut être dangereux, alors ne le mangez pas. Juste 'vole un baiser en dessous'!
RÉFÉRENCES ET REMERCIEMENTS
Mullins, Donald E. et Eaton, John L. Chromatographie quantitative à haute performance sur couche mince de dérivés dansyls d'amines biogéniques, Anal. Biochem., 1988, 172, (484-487).
Merci au chef Elf, Nigel Sousou, Ph.D., pour avoir dirigé le processus d'analyse des échantillons.