Caractérisation des canaux sodiques endogènes dans la lignée cellulaire de neuroblastome ND7-23: implications pour une utilisation en tant que système d'expression de canal ionique hétérologue adapté au dépistage automatisé par patch clamp
Xention Limited, Royaume-Uni; Université de Ljubljana, Slovénie
Abstract
La lignée cellulaire de neuroblastome de rongeur, ND7-23, est utilisée pour exprimer le sodium voltage-dépendant (Nav) et d'autres canaux ioniques neuronaux résistants à l'expression hétérologue dans les cellules d'ovaire de hamster chinois (CHO) ou de rein embryonnaire humain (HEK). Leur avantage est qu'ils fournissent des facteurs endogènes et des voies de signalisation pour favoriser le repliement, l'expression et la fonction des peptides des canaux ioniques à la surface cellulaire et sont également susceptibles de faire un patch clamping automatisé. Cependant, les cellules ND7-23 présentent des courants Nav sensibles à la tétrodotoxine endogène (TTX), et le profilage moléculaire a révélé la présence de transcriptions Nav1.2, Nav1.3, Nav1.6 et Nav1.7, mais aucune étude n'a déterminé quels sous-types contribuent aux canaux fonctionnels à la surface des cellules. Dans cette publication, nous avons profilé le répertoire de canaux Nav fonctionnels exprimés de manière endogène dans les cellules ND7-23 à l'aide de la plate-forme de patch clamp automatisée QPatch et de toxines sélectives et de petites molécules.
L'analyse des spectres de masse a été réalisée à l'aide de l'Advion exPression Spectromètre de masse compact (CMS).