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Synthèse multienzyme membranaire (MEME) de dérivés d'acide 2,7-anhydro-sialique

 

Marie Monestier, Dimitrios Latousakis, Andrew Bell, Sandra Tribal, Louise E. Tailford, Ian J. Colquhoun, Gwenaelle Le Gall, Hai Yu, Xi Chen, Martin Rejzek, Simone Dedola, Robert A. Field, Nathalie Juge

L'acide naturel 2,7-anhydro-alpha-N-acétylneuraminique (2,7-anhydro-Neu5Ac) est un produit de transglycosylation de trans-sialidases intramoléculaires (IT-sialidases) bactériennes. Une approche simple en un pot et deux enzymes a été établie pour la synthèse de dérivés de l'acide anhydro-sialique 2,7, y compris ceux contenant différentes formes d'acide sialique telles que Neu5Ac et l'acide N-glycolylneuraminique (Neu5Gc). L'approche est basée sur l'utilisation de IT-sialidase de Ruminoccocus gnavus pour la libération de l'acide anhydro-sialique 2,7 à partir de glycoprotéines et la conversion de l'acide sialique libre par une aldolase de l'acide sialique. Cette méthode de synthèse, basée sur une synthèse enzymatique membranaire, peut être réalisée à l’échelle préparative. En utilisant de la fétuine comme substrat, on a obtenu une production de 2,7-anhydro-Neu5Ac rentable et d'une grande pureté. Cette méthode a également été appliquée à la synthèse de 2,7-anhydro-Neu5Gc. La stratégie de multienzyme à membrane incluse (MEME) décrite ici fournit une approche efficace pour produire une variété de dérivés d'acide sialique.

L'analyse MS a été réalisée à l'aide d'Advion Expression® CMS ESI.