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Sonder les molécules de signalisation interroyaumes via l'analyse de surface par extraction liquide - spectrométrie de masse

 

Shaun N. Robertson, Fadi Soukarieh, Thomas M. White, Miguel Camara, Manuel Romero* et Rian L. Griffiths*

Abstract

Auparavant, les métabolites diffusés ou sécrétés à partir d'échantillons microbiens ont été analysés via des approches de chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS) suivant de longs protocoles d'extraction. Ici, nous présentons un système modèle pour la croissance de biofilms sur des disques avant d'utiliser l'échantillonnage de surface rapide et direct MS, à savoir l'analyse de surface d'extraction liquide, pour étudier l'exométabolome microbien. L'un des avantages de cette approche est sa nature spécifique à la surface, permettant d'imiter la formation de biofilm d'une manière que l'étude des cultures liquides planctoniques ne peut pas imiter. Même si Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), Staphylococcus aureus (S. aureus), et candida albicans (C. albicans) ont déjà été étudiés isolément, très peu d'études examinent la complexité de l'interaction entre ces agents pathogènes, qui sont généralement des agents causaux combinés d'infection. Notre système modèle fournit une voie pour étudier les changements dans l'exométabolome, tels que les métabolites qui deviennent circulatoires en présence de plusieurs agents pathogènes. Nos résultats sont en accord avec les rapports précédents montrant que 2-alkyl-4(1H)-molécules signal de quinolone produites par P. aeruginosa sont des marqueurs importants de l'infection et suggèrent que les méthodes de surveillance des niveaux de 2-heptyl-4-hydroxyquinoline et de 2,4-dihydroxyquinoline, ainsi que de pyocyanine, pourraient être bénéfiques dans la détermination des agents responsables de l'infection interroyaume, y compris P. aeruginosa. Par ailleurs, l'étude de l'évolution des métabolites de l'exométabolome entre pqs les antagonistes de détection de quorum dans les échantillons traités et non traités suggèrent la suppression de la production de phénazine par P. aeruginosa. Par conséquent, notre modèle fournit une approche analytique rapide pour acquérir une compréhension mécaniste de la signalisation bactérienne.

Advion Interchim Scientifique® TriVersa NanoMate® (Advion Interchim Scientific®, Ithaca, NY) a été utilisé pour l'échantillonnage LESA.