Lipidomique de fusil de chasse sur un spectromètre de masse LTQ Orbitrap par commutation successive entre les modes de polarité d’acquisition
Auteurs: Max Planck Institute of Molecular Cell Biology and Genetics, Université de technologie de Dresde, Allemagne; Advion Biosciences Ltd., Royaume-Uni
Abstract
La lipidomique de haut en bas repose sur l'infusion directe d'extraits de lipides totaux dans un spectromètre de masse en tandem haute résolution et implique que les lipides individuels sont reconnus par leur détermination précise m/z. L'efficacité de l'ionisation des lipides et la spécificité de la détection dépendent fortement de la polarité d'acquisition, et il est donc avantageux d'analyser les mélanges lipidiques dans les modes positifs et négatifs. Les spectromètres de masse hybrides LTQ Orbitrap sont largement utilisés dans la lipidomique descendante; cependant, une commutation rapide de polarité était auparavant impossible en raison de la dégradation sévère et immédiate de la précision de la masse. Ici, nous rapportons une méthode pour acquérir rapidement des spectres haute résolution dans les deux modes de polarité avec une précision de masse inférieure à ppm et démontrons qu'elle simplifie et accélère non seulement les analyses lipidomiques des fusils de chasse, mais améliore également la couverture lipidique car plus de classes de lipides et plus d'espèces individuelles au sein de chaque classe sont reconnus. De cette manière, l'analyse au fusil de chasse d'extraits lipidiques totaux du plasma sanguin humain a permis de quantifier 222 espèces de 15 classes lipidiques majeures dans un cycle d'acquisition de 7 min.
L'analyse Nano-ESI et la commutation de polarité en ligne ont été réalisées à l'aide de l'Advion TriVersa NanoMate.