微量抽出ICP-MSによるスワイプ表面のウラン同位体直接分析
概要
天然物は、伝統的な薬を探索することと薬理学の新しい空間を発見することの両方によって、前臨床創薬のインスピレーションの源となっています。 天然物の分離と特性評価は、創薬における主要な障壁であり続けています。 分離は一般に分析スケールで行われ、スケールアップ精製が試行される前に化合物が完全に特性評価されます。 非常に特異的なMSデータによって複雑な天然物混合物中の化合物を精製する機能により、プロセスの精製および特性評価ステップを簡素化できます。 ここでは、フラッシュクロマトグラフィーとプレップクロマトグラフィーをMS検出と組み合わせて、緑茶およびターメリック抽出物中の天然物を精製します。
メソッド
緑茶の主要なカテキンとターメリックの主要なクルクミノイドの分離は、抽出によって完了しました。 緑茶の葉を抽出し、UPLC-MSと分析標準を使用して粗物質を分析し、目的のカテキンを特定し、分離に適したprep-LCメソッドを開発しました。 ウコン粉末を抽出し、Advion's PlateExpressを使用したTLC-MSで分析しました。™ 目的の化合物を特定し、分離に適したフラッシュクロマトグラフィー法を開発します。 両方の抽出物は、Advionのexに接続されたInterchimのpuriFlash5.250フラッシュ/プレップクロマトグラフィーシステムを使用した質量指定フラクションコレクションを使用して精製されました。 expression CMS® シングル四重極質量分析計。 XICMSチャネルを使用してターゲット化合物を検出しました。 次に、単離された化合物の純度を、HPLC-MSを使用して決定した。
予備データ
ウコンの3つの主要なクルクミノイド（クルクミン、デメトキシクルクミン、ビスデメトキシクルクミン）と緑茶の5つの主要なカテキン（（-）-エピガロカテキン（EGC）、（-）-エピカテキン（EC）、（-））を分離することに成功しました。 -エピガロカテキン-3-ガレート（EGCG）、（-）-エピカテキン-3-ガレート（ECG）、および（-）-高純度（95％以上）のガロカテキンガレート（GCG）。
クルクミノイドを精製するためにTLC（97：3 DCM：MeOH）を使用してアイソクラティックフラッシュクロマトグラフィー法（97：3 DCM：MeOH）を開発しました。 TLCプレートはAPCIによって分析されました– サンプル調製を必要とせずにプレートから直接スポットを抽出するPlateExpressを使用するMS。 フラクションは、APCIで抽出されたイオンクロマトグラム（XIC）チャネルを使用して収集されました– MS。 その後、フラクションはASAPによって特徴付けられました– 各フラクションのMSと純度は、HPLC-MSを使用して決定しました。
目的の各化合物を同定するために、HPLC-MSと参照標準を使用して、緑茶中のカテキンの分取LCメソッドを開発しました。 水メタノールグラジエントを使用し、目的の化合物に設定されたXICチャネルを使用してフラクションを収集します。 画分を特徴づけ、それらの純度をHPLC-MSによって決定した。 EGC、EGCG、GCG、およびECGフラクションは、それぞれ100％、99.8％、98.8、および100％の純度であると判断されました。
