出版
安定同位体標識基質の代謝フラックスを迅速にマッピングするための直接注入質量分析法
抽象
直接注入高分解能質量分析（DI-HRMS）は、血液、脳脊髄液、組織サンプル、培養細胞中の複雑な代謝物混合物の迅速なプロファイリングを可能にします。本稿では、培養細胞およびオルガノイド中の同位体標識基質の代謝フラックスを迅速に測定するのに適したDI-HRMS法を紹介します。Cおよび/またはN標識解糖系およびトリカルボン酸回路中間体、ならびにそれらの誘導体の大部分を最もよく表す標識付加物を選択することで、自動注釈パイプラインを採用しました。さらに、バリン、ロイシン、およびそれらの分解産物のいくつかを含めました。DI-HRMSにより、ピルビン酸脱水素酵素（PDHA1）およびグルタミナーゼ（GLS）を含む単一の代謝酵素の遺伝子変異に起因する、これらの経路に沿った代謝フラックスの予想される変化と予想外の変化を測定できることを示します。さらに、患者由来肝オルガノイドにおけるメチルマロニルCoAムターゼの喪失に伴う代謝適応を正確に特定できます。本研究の結果は、DI-HRMSと安定同位体標識化合物の組み合わせが、フラクソミクスの効率的なスクリーニング法として有効であることを示唆しています。
Advion Interchim Scientific® トリバーサ® ナノメイト® (Advion、ニューヨーク州イサカ) を利用しました。
