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強化された流動性液体クロマトグラフィー：分析分離から分取分離へのスケールアップのガイド

Merck＆Co。

抽象

超臨界流体クロマトグラフィー（SFC）機器の進化、改善された検出機能、および拡張されたモディファイア範囲により、SFCの範囲が、エナンチオ選択的分離を超えた幅広い分析対象物の分析にまで拡大されました。ただし、分取SFCは、特に極性の高い分析対象物の精製に関して、同じ技術的活性化をまだ見ていません。高速液体クロマトグラフィー（EFLC）は、SFC機器の適用範囲をタンパク質、炭水化物、ヌクレオチドなどの極性の高い分析対象物に拡張する方法のXNUMXつとして実証されています。親水性代謝物と類似体の混合物に挑戦するためのEFLCの最近の適用にもかかわらず、製薬業界にとって非常に重要な分取精製におけるその実行可能性は不明のままです。ここでは、実行可能なEFLC精製方法を達成するために重要な複数のクロマトグラフィーパラメーターを調査しました。これには、モディファイア組成の関数としてのシステム圧力が含まれます（いくつかのMeOH：Hの場合）。₂O比）、ピーク形状に対する希釈剤注入条件の影響、および希釈剤組成による質量負荷の最適化。 50％のアセトニトリルまたはメタノール希釈剤を使用すると、最大の容量負荷容量が得られました。ショ糖の場合、水へのより高い分析対象物の溶解度を活用することは、より高い有機物含有量の希釈剤の体積負荷容量よりも有利であることが証明されました。実際、80cmの分取HILICカラムに2mgのショ糖を注入することで、ピーク形状の劣化を最小限に抑えることができました。組み合わされた情報は、すぐに利用できるMS指向のSFC機器を使用した糖の分取分離のためのEFLCの実証に成功しました。