Advion TriVersaNanoMate®LESA®テクノロジーを特徴とする、薄い組織切片の無傷のタンパク質およびタンパク質複合体のネイティブ質量分析イメージング
リアン・L・グリフィス、エマ・K・シスリー、アンドレア・F・ロペス・クラヴィア、アンナ・L・シモンズ、イアン・B・スタイルズ、ヘレン・J・クーパー
ここでは、マウスの脳および肝臓組織からのタンパク質およびタンパク質複合体のネイティブ液体抽出表面分析（LESA）質量分析イメージングを紹介します。 無傷のタンパク質は、特徴的に低い電荷状態で検出され、タンパク質が折り畳まれたままであることを示しています。 脳では、ユビキチンやβチモシン4などの豊富なタンパク質が組織全体で均一に検出されたのに対し、ニューログラニンなどの他のタンパク質は特定の解剖学的領域に局在していました。
肝臓では、タンパク質結合体（四量体ヘモグロビン）のイメージング、および脂肪酸結合タンパク質が実証されています。 興味深いことに、ネイティブのような溶媒を使用すると、変性溶媒を使用したLESA実験ではこれまで観察されなかったタンパク質の抽出が可能になります。 さらに、ネイティブLESAイオン移動度分光法が提示され、組織から抽出されたタンパク質の衝突断面積が進行波イオン移動度分光法によって決定されることがあることが示されています。 ユビキチンの5 +イオンの衝突断面積は、1047Åとして計算されました。2、ユビキチンタンパク質標準溶液の測定とよく一致しています。 β-サイモシン4、β-サイモシン4、および2つの未同定タンパク質の10 +イオンの衝突断面積、および分子量10 Daの未同定タンパク質の15660 +イオンの衝突断面積も計算されました。
質量分析および質量分析イメージングの場合、サンプルはnanoESIを使用して質量分析計に導入されました。 TriVersa NanoMate® （Advion Biosciences、イサカ、米国）。 サンプリングする正確な場所は、LESAを使用して選択されました® ポイントソフトウェア（Advion）。
