肽纯化:使用puriFlash 5.250P和表达CMS进行Flash-MS偶联

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为了适应,Interchim成立了一个实验室,可以进行在线演示。 这些演示可以围绕“标准”产品的纯化进行阐述,以展示我们仪器的潜力。 本示例演示了具有Interchim puriFlash 5.250和Advion ex的flash-ms系统的功能。expression 紧凑型质谱仪(CMS)用于纯化肽。

装置

为了纯化化学合成产生的肽,我们使用了puriFlash 5.250P。 为了监测这种纯化,我们使用了紫外线检测器和Advion exexpression CMS。

通过质谱检测肽段是使用ESI离子源进行的,这对于检测大分子(如肽段)非常理想。 少量产品被MS接口“转移”以进行检测。

流动注射分析(FIA)

防爆样品直接进样expression CMS。

这是所得质谱图:

我们观察到一个峰值 m / z 643,对应于带电3倍的感兴趣分子(M + 3H)3+以及的峰值 m / z 964.3,对应于充电2次(M + 2H)的目标分子2+.

HPLC条件


结果如下:

转座与纯化

使用带有制备柱的肽柱: PFB5C18T-150 / 212。

首先,将分析型HPLC方法转换为制备型HPLC方法。

然后,增加注射样品的浓度,以便能够在一次运行中纯化最大量的产品。

感谢puriFlash 5.250P系统与exexpression CMS,目标产物基于其质量进行纯化和收集。