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傅里叶变换质谱中受等压重叠影响的脂质种类的准确定量

 

作者:雷根斯堡大学医院,欧洲分子生物学实验室,德国; 丹麦南丹麦大学

抽象

脂质组学数据需要考虑质量接近相同的离子,其中包括 II 型同位素重叠。 这种重叠发生在一系列脂质物种中,仅因双键 (DB) 的数量而异,这主要是因为 13C-原子。 高分辨率质谱法,例如傅里叶变换质谱法 (FTMS),能够根据质量分辨能力解析 II 型重叠。 在这项工作中,我们评估了受 II 型重叠影响的脂质种类的 FTMS 定量准确性。 通过流动注射分析-FTMS 分析了使用各种脂质类别的脂质种类对的尖峰实验。 在没有和有 II 型校正(使用相对同位素丰度)以及利用第一个同位素峰 (M+1) 的情况下评估了量化的准确性。 得到充分分离的等压峰在没有 II 类校正的情况下最准确。 在部分解析峰的情况下,我们观察到峰干扰导致质量和强度失真,这是 FTMS 中一个很好描述的现象。 当从 M+1 计算时,各个物种的浓度更准确。 此外,一些受大量 II 型重叠影响的小物种只能通过 M+1 进行量化。 出乎意料的是,由于峰干扰,即使是完全未分辨的峰也被 II 类校正严重过度校正。 所描述的方法经过验证,包括人血清和成纤维细胞样本的日内和日间精度。 总之,我们的结果表明,通过 FTMS 对脂质种类进行准确量化需要依赖于分辨率的数据分析。

使用 Advion TriVersa NanoMate 注入样品。