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利用直接进样质谱法快速绘制稳定同位素标记底物的代谢通量图
抽象
直接进样高分辨率质谱（DI-HRMS）能够快速分析血液、脑脊液、组织样本和培养细胞中复杂的代谢物混合物。本文介绍了一种适用于快速测定培养细胞和类器官中同位素标记底物代谢通量的DI-HRMS方法。我们改进了一个自动化注释流程，筛选出最能代表大多数C和/或N标记的糖酵解和三羧酸循环中间体及其多种衍生物的标记加合物。此外，缬氨酸、亮氨酸及其几种降解产物也被纳入其中。我们证明，DI-HRMS可以测定由单个代谢酶（包括丙酮酸脱氢酶（PDHA1）和谷氨酰胺酶（GLS））基因改变引起的这些代谢途径中代谢通量的预期和非预期变化。此外，该方法还能精确定位患者来源的肝脏类器官中甲基丙二酰辅酶A变位酶缺失引起的代谢适应。我们的研究结果凸显了DI-HRMS与稳定同位素标记化合物联用作为代谢组学高效筛选方法的强大优势。
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