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采用AdvionTriVersaNanoMate®LESA®技术的薄组织切片中完整蛋白质和蛋白质复合物的原生质谱成像

 

Rian L. Griffiths，Emma K. Sisley，Andrea F. Lopez-Clavija，Anna L. Simmonds，Iain B. Styles，Helen J. Cooper

在这里，研究人员提出了来自小鼠脑和肝组织的蛋白质和蛋白质复合物的天然液体提取表面分析（LESA）质谱成像。 在特征性的低电荷状态下检测到完整蛋白质，表明蛋白质保持折叠。 在脑中，遍布组织均匀地检测到泛素和β胸腺素4等丰富的蛋白质，而其他蛋白质如神经颗粒素则定位于特定的解剖区域。

在肝脏中，证明了蛋白质复合物（四聚体血红蛋白）的成像，以及脂肪酸结合蛋白。 有趣的是，使用天然样溶剂能够提取蛋白质，这些蛋白质先前在使用变性溶剂的LESA实验中未观察到，即天然LESA可用于扩展观察到的蛋白质范围。 此外，提出了天然LESA离子迁移率光谱法，并且显示了从组织提取的蛋白质的碰撞截面可以通过行波离子迁移率光谱测定法来确定。 遍在蛋白的5 +离子的碰撞截面计算为1047Å2，与泛素蛋白标准溶液的测量结果非常一致。 还计算了β-胸腺素4，β-胸腺素4和两种未鉴定蛋白质的10 +离子的碰撞截面，以及分子量为10 Da的未鉴定蛋白质的15660 +离子的碰撞截面。

对于质谱和质谱成像，使用a。通过nanoESI将样品引入质谱仪 TriVersa NanoMate® （Advion Biosciences，伊萨卡，美国）。 使用LESA选择要采样的确切位置® 积分软件（Advion）。