Hochdurchsatz-Reinigung von fünf rezeptfreien und verschreibungspflichtigen Wirkstoffen durch präparative Umkehrphasen-LC-MS
Anzeigen / Instrumente:
puriFlash® 5.250
exPresseIon® CMS
Uptisphere® StrategyTM-Säule US5C18HQ-150/300
Autoren:
Advion Interchim Scientific, Hauptsitz in Montluçon, Frankreich
Einführung
Die Reinigung ist ein entscheidender Schritt in der Arzneimittelentwicklung. Von der Forschung über die Skalierung bis hin zur Verarbeitung sind Reinigung und Bestätigung wesentliche Schritte, um ein Medikament auf den Markt zu bringen. Es ist wichtig, über eine Hochdurchsatzlösung zu verfügen, die eine ausreichende Menge und reproduzierbare Qualität der gereinigten Verbindungen bietet. Die Trennung der pharmazeutischen Wirkstoffe (APIs) von ihren Verunreinigungen lässt sich leicht mit einem präparativen Chromatographiesystem erreichen.
In diesem Anwendungshinweis geht es um die Reinigung von fünf Wirkstoffen, die in rezeptfreien Medikamenten (OTC) enthalten sind, darunter Koffein, Glafenin, Ketoprofen, Flavon und Fenofibrat (Abbildung 1), durch einen präparativen Reinigungsworkflow mit Bestätigung mithilfe eines kompakten Massenspektrometers.
Abbildung 1: Zu den fünf interessierenden Verbindungen gehören Koffein, Glafenin, Ketoprofen, Flavon und Fenofibrat. Im Folgenden werden chemische Strukturen und pharmazeutische Anwendungsfälle hervorgehoben.
Koffein: Koffein ist eine natürliche Chemikalie mit stimulierender Wirkung und kommt gereinigt in Tablettenform vor oder kommt natürlicherweise in Kaffee, Tee, Kakao und mehr vor.
Glafenin: Glafenin, ein nichtsteroidales entzündungshemmendes Medikament (NSAID), wurde 1991 aufgrund eines hohen Anaphylaxierisikos vom Markt genommen.
Ketoprofen: Zur Behandlung wird Ketoprofen eingesetzt, ein verschreibungspflichtiges nichtsteroidales entzündungshemmendes Medikament (NSAID). Entzündungen, Schwellungen, Steifheit und Gelenkschmerzen. Das Medikament wurde 1995 aufgrund des erhöhten Risikos für Herzinfarkt, Schlaganfall, Reizungen und andere Probleme abgesetzt.
Flavon: Ein Metabolit und Nematizid, das häufig in Pflanzen vorkommt.
Fenofibrat: Ein verschreibungspflichtiges Medikament zur Senkung und Behandlung hoher Cholesterin- und Triglyceridspiegel (fettähnliche Substanzen) im Blut.
Experiment
Explorative LC-Trennung
Abbildung 2: Um das Vorhandensein der vorab identifizierten Verbindungen zu bestätigen, bestätigte ein explorativer LC-UV-Lauf das Vorhandensein der Arzneimittelverbindungen vor der Reinigung.
Präparativer LC-Lauf
Nach der positiven ID der fünf interessierenden Verbindungen und ihren Elutionspunkten war die Arzneimittelmischung dann bereit für einen präparativen LC-UV-Lauf auf dem puriFlash® 5.250 iELSD. Die Reinigung wird durch das iELSD-Paket unterstützt und ermöglicht den Nachweis chromophorfreier Verbindungen (Abbildung 3).
Ergebnisse und Validierung
Ergebnisse der Trennung und Reinigung
Die Identität der getrennten Verbindungen wurde mit dem Advion Interchim Scientific ex bestätigtPresseIon® Kompaktes Massenspektrometer zur schnellen und genauen Identifizierung der interessierenden Verbindungen.
Die Reinheit dieser Verbindungen kann mittels HPLC im analytischen Maßstab überprüft werden.
