Purificación de alto rendimiento de cinco compuestos de medicamentos recetados y de venta libre mediante LC-MS preparativa de fase inversa
Instrumentación:
puriFlash® 5.250
exprensaion® CMS
Uptisfera® Columna StrategyTM US5C18HQ-150/300
Escritores:
Advion Interchim Scientific, Montluçon, Francia Sede
Introducción
La purificación es un paso crítico en el desarrollo de fármacos. Desde la investigación hasta la ampliación y el procesamiento, la purificación y la confirmación son pasos esenciales para llevar un fármaco al mercado. Es esencial contar con una solución de alto rendimiento que ofrezca una cantidad suficiente y una calidad reproducible de compuestos purificados. La separación de los ingredientes farmacéuticos activos (API) de sus impurezas se puede lograr fácilmente con un sistema de cromatografía preparativa.
Esta nota de aplicación presenta la purificación de cinco ingredientes activos que se encuentran en los medicamentos de venta libre (OTC), incluidos la cafeína, la glafenina, el ketoprofeno, la flavona y el fenofibrato (Figura 1), mediante un flujo de trabajo de purificación preparativa con confirmación mediante un espectrómetro de masas compacto.
Figura 1: Los cinco compuestos de interés incluyen cafeína, glafenina, ketoprofeno, flavona y fenofibrato. Las estructuras químicas y los casos de uso farmacéutico se destacan a continuación.
Cafeína: Una sustancia química natural con efectos estimulantes, la cafeína se puede encontrar purificada en forma de tabletas o de forma natural en el café, el té, el cacao y más.
Glafenina: Un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (AINE), la glafenina, se retiró del mercado en 1991 debido al alto riesgo de anafilaxia.
Ketoprofeno: Un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (AINE) de venta con receta, el ketoprofeno se utiliza para tratar inflamación, hinchazón, rigidez y dolor en las articulaciones. El medicamento se suspendió en 1995 debido al aumento del riesgo de ataque cardíaco, accidente cerebrovascular, irritación y otros problemas.
Flavona: Un metabolito y nematicida que existe comúnmente en las plantas.
Fenofibrato: Medicamento recetado que se usa para reducir y tratar los niveles altos de colesterol y triglicéridos (sustancias similares a las grasas) en la sangre.
Experimento
Separación LC exploratoria
Figura 2: Para confirmar la presencia de los compuestos preidentificados, una serie LC-UV exploratoria confirmó la presencia de los compuestos farmacológicos antes de la purificación.
Ejecución de LC preparativa
Después de la identificación positiva de los cinco compuestos de interés y sus puntos de elución, la mezcla de fármacos estaba lista para una ejecución preparatoria de LC-UV en el puriFlash.® 5.250 iELSD. El paquete iELSD ayuda a la purificación, lo que permite la detección de compuestos libres de cromóforos (Figura 3).
Resultados y Validación
Resultados de separación y purificación
La identidad de los compuestos separados se confirmó utilizando el Advion Interchim Scientific exprensaion® Espectrómetro de masas compacto, que identifica de forma rápida y precisa los compuestos de interés.
La pureza de estos compuestos se puede verificar mediante HPLC a escala analítica.
