Sondeo de moléculas de señalización entre reinos a través del análisis de superficies de extracción de líquidos: espectrometría de masas
Shaun N. Robertson, Fadi Soukarieh, Thomas M. White, Miguel Camara, Manuel Romero* y Rian L. Griffiths*
Resumen
Anteriormente, los metabolitos difundidos o secretados por muestras microbianas se analizaban mediante enfoques de cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) siguiendo largos protocolos de extracción. Aquí, presentamos un sistema modelo para cultivar biopelículas en discos antes de utilizar MS de muestreo de superficie rápido y directo, es decir, análisis de superficie de extracción líquida, para estudiar el exometaboloma microbiano. Uno de los beneficios de este enfoque es su naturaleza específica de superficie, lo que permite imitar la formación de biopelículas de una manera que el estudio de cultivos líquidos planctónicos no puede imitar. A pesar de Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), Staphylococcus aureus (S. aureus), y Candida albicans (C. albicans) han sido estudiados previamente de forma aislada, muy pocos estudios consideran la complejidad de la interacción entre estos patógenos, que comúnmente son agentes causales de infección combinados. Nuestro sistema modelo proporciona una ruta para investigar los cambios en el exometaboloma, como los metabolitos que se vuelven circulatorios en presencia de múltiples patógenos. Nuestros resultados concuerdan con informes previos que muestran que el 2-alquil-4(1Hmoléculas de señal de )-quinolona producidas por P. aeruginosa son marcadores importantes de infección y sugieren que los métodos para monitorear los niveles de 2-heptil-4-hidroxiquinolina y 2,4-dihidroxiquinolina, así como la piocianina, podrían ser beneficiosos en la determinación de los agentes causantes de la infección entre reinos, incluidos P. aeruginosa. Además, estudiar los cambios en los metabolitos del exometaboloma entre pqs antagonistas de detección de quórum en muestras tratadas y no tratadas sugiere la supresión de la producción de fenazina por P. aeruginosa. Por lo tanto, nuestro modelo proporciona un enfoque analítico rápido para obtener una comprensión mecánica de la señalización bacteriana.
Advion Interchim Científico® TriVersa NanoMate® (Advion Interchim Científico®, Ithaca, NY) se utilizó para el muestreo LESA.