Développement et application du profilage lipidique monocellulaire à haut débit: étude de SNCA-A53T Neurones dopaminergiques humains
Université de Cambridge, Royal Holloway University of London
Avantages
- Combinaison de FACS et LESA-MS pour établir un profilage lipidique monocellulaire à haut débit
- Différences lipidiques trouvées au sein et entre les populations de neurones dopaminergiques humains
- L'hétérogénéité lipidique intercellulaire est augmentée SNCA-A53T neurones dopaminergiques
- Identification et isolement des neurones iPSC-dopamine humains avec un rapporteur TH-RFP
Résumé
Les progrès de la génomique et de la transcriptomique unicellulaires ont montré qu'au niveau des tissus, il existe une hétérogénéité cellulaire complexe. Pour comprendre l'effet de cette hétérogénéité intercellulaire sur le métabolisme, il est essentiel de développer une approche de profilage lipidique monocellulaire qui permet la mesure des lipides dans un grand nombre de cellules individuelles d'une population. Cela fournira une lecture fonctionnelle de l'activité cellulaire et de la structure de la membrane. En utilisant une analyse de surface d'extraction de liquide couplée à une spectrométrie de masse à haute résolution, nous avons développé une méthode à haut débit pour le profilage des lipides monocellulaires non ciblés. Cette avancée technologique a mis en évidence l'importance de l'hétérogénéité cellulaire dans le métabolisme fonctionnel des neurones dopaminergiques humains individuels, suggérant que l'alpha-synucléine A53T (SNCA) les neurones mutants ont une fonction membranaire altérée. Ces résultats démontrent que cette plateforme de profilage lipidique monocellulaire peut fournir des données robustes qui élargiront les frontières de la recherche biomédicale.